Pehea e hopena ai kēia mau mea i waho
Pehea kouʻike e pili ana i nā hoʻolālā hoʻopunipuni? E hōʻoia i ka noʻonoʻo i ka mea a lākou e hana ai a me ke kumu o ka waiwai nui o lākou, me kēia hōʻike.
Ke weheweheʻana i nā'ōlelo Enzymes
ʻO ka endonuclease ka palena o kekahiʻano o ka enzyme eʻoki ana i nā molecuke DNA. Ke hoʻomaopopo nei kēlā me kēia leka i kahi laina kūikawā o nā nucleotides ma ke kaʻina DNA. ʻO kēlā mau hopena e pili pinepine paha i 4 a 6 mau kumuhana lōʻihi. He palindromic ke alapine i ka hoʻohui likeʻana o ke kaʻina DNA i ka mea hoʻokahi ma kaʻaoʻao hope.
I kekahi'ōlelo'ē aʻe, eʻokiʻia nā kaulaʻelua o ka DNA i kahi hoʻokahi.
Kahi Loaʻa i kēia mau Enzymes
Loaʻa nā'ōlelo enzymes i nāʻanoʻeha'ē aʻe o nā huapalapala i kahi o ko lākou kūlana ola ke komo i loko o ka pale pale. Ke hoʻopili nei kēia mau hua'ōlelo i "DNA'ē aʻe (e like me viral) DNA e komo i loko o ke keʻena, ma ka lukuʻana iā ia. ʻO ka pūnaewele pūnaewele he polokalamu hoʻololi-hoʻololi i hoʻololi i kāna iho DNA ma nā wahi kiko'ī no kona mau enzymes kauā, a laila palekana iā ia mai ka cleavage. Uaʻikeʻia ma mua o 800 mau enzymes iʻikeʻia e hōʻoia ana ma mua o 100 mau hanana nucleotide.
E hoʻohana i ka Biotechnology
Hoʻohanaʻia nā enzymes e kaohi i loko o ka biotechnology eʻokiʻoki i ka DNA i nā liʻiliʻi liʻiliʻi e hiki ai ke aʻo i ka lōʻihi o ka lōʻihi ma waena o kēlā me kēia kanaka (Kaohiʻana i ka Politicor Length Polymorphism - RFLP). Hoʻohana pūʻia lākou no ka hoʻopiliʻana i ke kaha.
Ua hoʻohanaʻia nāʻano RFLP no ka hoʻoholoʻana i kēlā mau kanaka a mau hui paha o nā kānaka he mauʻokoʻa kūikawā ma nā papahana hanauna a me nāʻano pale paleʻana i kekahi mau'āpana o ka genome.
ʻO kaʻike o kēia mauʻano kūikawā ke kumu no ka DNA lima lima . Hoʻokahi o kēia mauʻano e pili ana i ka hoʻohanaʻana i ka electrophoresis gel agarose no ka kaʻawaleʻana o nā'āpana DNA. ʻO ka pahū TBE, i hanaʻia me ka base Tris, acidic acid, a me EDTA, hoʻohana mauʻia no ka electrophoresis gel agarose e nānā i nā hua DNA.
Nāʻano o ka Paukū Enzymes
ʻEkolu mauʻano likeʻole o nā enzymes. Keʻano eʻoki au iā DNA ma nā wahi kiko'ī a hiki i kahi 1000 aʻoi aku paha o nā kumuhana mai ka pūnaeweleʻike. Penei ka'Ālika III i kahi kokoke i 25 mau kumuhana mai kahi pūnaewele. I nāʻano I a me III ka pono o ka ATP a hiki paha ke lilo i mau enzymes nui me nā'āpana'āpana he nui. Nāʻano enzymes II, i hoʻohana nuiʻia i loko o ka biotechnology, ke okiʻiaʻo DNA ma loko o ka pūnaekeʻikeʻia me kaʻole pono o ka ATP a ua liʻiliʻi a maʻalahi hoʻi.
Hiki ke kapaʻia nāʻano enzymesʻo keʻano II e like me nāʻano bacteria mai kahi mamao aku. Eia kekahi laʻana, ua hoʻokaʻawaleʻia ka enzyme EcoRI mai E. coli . ʻO ka hapanui o nā poʻe'ēheu ka mea maʻauna i ka pōʻino o E. coli i ka meaʻai.
Hiki i nā enzymes hoʻolālā kūlohelohe ke hoʻohālua i nāʻanoʻoki likeʻole e pili ana inā eʻokiʻoki lākou i nā kaulaʻelua ma ke kikowaena o ka pūnaewele hōʻoia aiʻole kēlā a me kēia kele e pili kokoke i kahi hopena o ka pūnaeweleʻike.
ʻO kaʻoki mua e hoʻopuka i nā "hope loa" me ka paleʻole nucleotide. Hoʻokumu ka hopena i nā "pale" a iʻole "nā kālepa" no ka mea,ʻo kēlā me kēia'āpana hua'ōlelo o ka DNA, he pale e hoʻonani ana i nā mau'āpana. Hoʻohana nā meaʻelua i nā genetic molepika no ka hanaʻana i ka DNA recombinant a me nā proteins.
Hiki keʻano o kēiaʻano DNA no ka mea, ua hanaʻia e ka ligation (hoʻopaʻa pūʻana) o nāʻokoʻaʻelua aʻoi aku paha i huiʻoleʻia.