He aha nā mea koʻikoʻi e hana me nāʻano a me ka kalaʻana
ʻO ka'ōmole mole mole,ʻo ka veʻa he mole DNA e lawelawe ana i mea halihali no ka hoʻoiliʻana a iʻole hoʻokomoʻana o nā lāhui haole (s) i loko o kekahi pūnaewele'ē aʻe, ma kahi e hiki ai ke hoʻopili hou a / a iʻole ia. ʻO nā vekō kekahi o nā mea hana kūpono no ka hoʻopiliʻana i ke kaha aʻoi aku ka maikaʻi loa inā lākou e hoʻopili i kahiʻano marker e hoʻopili ana i kahi mole mole bioindicator e hiki ke anaʻia i loko o keʻano olaolaola e hōʻoia i ko lākou hoʻohuiʻana, a me ka'ōleloʻana, ma ke kikowaena pū.
ʻO ke kiko'ī, he DNA i laweʻia mai kahi huapiʻi, plasmid aiʻole pūnaewele (o nā meaʻoi akuʻoi aʻe) e hoʻokomoʻia me kahi'āpana DNA'ē aʻe no nā hana hoʻopili. No ka hiki ke mālama ponoʻia ka velo kiʻi hoʻomalu i loko o ke kino, aia nō hoʻi i loko o ka vector kekahi mau hiʻohiʻona e hiki ai ke hoʻokomo a wehe paha i ka DNA. Ma hope o ka paʻiʻiaʻana i loko o ka vele kiʻi, e hiki ke hoʻolilo houʻia i nā'āpana DNA i kekahiʻokoʻa'ē aʻe e hiki ke hoʻohanaʻia me keʻano pololei.
I kekahi mau kumu, hoʻohanaʻia nā maʻi'elepona e hoʻopili i nā bacteria. Ua kapaʻia kēia mau'īlio i ka bacteriophages, aiʻole phage, no ka pōkole. ʻO nā mea kāpiliʻia he mau meaʻoihana maikaʻi no ka hoʻokomoʻana i nā kiwi i nā pūnaewele holoholona. ʻO nā plasmids, he mau'āpana'āpana DNA,ʻo nā mea nui i hoʻohanaʻia i hoʻokomoʻia i ka hoʻokomoʻana i ka DNA'ē aʻe i nā pūpū bacteria. Hoʻohui pinepine lākou i nā kinakeneʻaeʻa pale kino e hiki ke hoʻohanaʻia no ka ho'āʻoʻana no ka hōʻikeʻana o ka DNA plasmid, ma nā pāpāpiʻi pateta.
Hoʻonuiʻia ka hoʻoiliʻana i loko o nā kiʻekiʻena mea kanu me ka hoʻohanaʻana i ka huapalapala kino o ka honua Agrobacterium tumefaciens , e hana ana he vector a hoʻokomo i kahi plasmid nui i loko o ka hale pūnaewele. ʻO nā mau pūnaewele wale nō e loaʻa ai ka pale kinipona ke ulu aʻe i ka wā e noho ana nā mea'alopero.
ʻO nāʻano nui o ka uhiʻana i nā Vekena
ʻO nā mea nuiʻeono o ka vek:
- Plasmid. ʻO ka'āpana extrachromosomal DNA e hoʻopili pono ana i loko o ka pūpū kino. Loaʻa i nā plasmids ke kope kope nui, e like me ka pUC19 i loaʻa he kope o 500-700 kope ma ke kamepiula.
- Hōkū. Nā huahana DNA linear i loaʻa mai o ka bacteriophage lambda. Hiki ke hoʻololi iā ia me ka DNA'ē aʻe me ka hoʻopōʻinoʻole i kona pōʻaiapuni.
- ʻO Cosmids. ʻO kekahi o ka mole extrachromosomal DNA i hoʻohuiʻia nāʻano o plasmids a me phage.
- Nā Kino Pahūkika Kino. Ma muli o nā pāpili pūnaewele F-bacteria.
- ʻO ka meaʻawaʻawa Artificial Chromosomes. ʻO kēia kahi chromosome artificial i loko o nā kelomeres (nā mea momona i laweʻia ma nā hope o nā chromosomes i hōʻokiʻia i ka wā o ka puʻupuʻu) me nā kumu o ka replication, kahi centromet leve (kahi o kahi chromosome e pili ana i nā chromatids wahine a i dyad), a me kahi mea koho no kaʻike i nā pūnaewele lev.
Ke Kikū a me ke Kino. ʻO kēiaʻano velem hiki ke hoʻohana ponoʻia no ka hāʻawiʻana i ka moʻo i nā pūnaewele kanaka, a me kahi mea hana no kaʻikeʻana i kaʻike a me ka hoʻoholoʻana i ka hana pono kanaka. Hiki iā ia ke lawe i kahi'āpana DNA nui loa.
ʻO nā mechanical engineered a pau ke kumu o ka replication (kahi replicator), kahi pae hoʻolima (kahi i hoʻokomoʻia ai ka DNA'ē aʻe iʻole e hōʻino i ka hoʻopiʻiʻana a iʻole ka hanaʻana o nā mea kaha), a me kahi mea koho (e like me keʻano he kūpono i ka lāʻauʻae.)